Máy tiệt trùng áp suất cao công nghiệp là thiết bị tiệt trùng thường được sử dụng trong các thí nghiệm sinh học. Có thể chia thành ba loại: loại di động, loại đứng và loại ngang theo dung tích. Được sử dụng rộng rãi trong các trường cao đẳng và đại học, y tế và sức khỏe, công nghiệp hóa chất thực phẩm, nghiên cứu sinh học và các đơn vị khác để khử trùng dụng cụ, băng, đồ dùng, thuốc dạng lỏng, môi trường nuôi cấy và các mặt hàng khác.
Máy hấp tiệt trùng công nghiệp là dụng cụ kiểm tra bắt buộc, nhưng việc kiểm tra bắt buộc chỉ đánh giá các thông số vật lý của dụng cụ. Do đó, các máy tiệt trùng đã trải qua quá trình kiểm tra bắt buộc cũng phải trải qua quá trình xác minh hiệu quả tiệt trùng. Một số đơn vị thường bỏ qua vấn đề quan trọng này. Máy tiệt trùng di động trong nước thường cho thấy kim chỉ đạt đến nhiệt độ yêu cầu, nhưng nhiệt độ thực tế của vật dụng đã tiệt trùng không đạt yêu cầu. Điều này sẽ dẫn đến việc khử trùng vật phẩm không hoàn toàn và ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm. Việc khử trùng môi trường nuôi cấy không hoàn toàn sẽ ảnh hưởng đến việc sử dụng môi trường nuôi cấy và việc đánh giá kết quả. Do đó, việc xác minh hiệu quả vô trùng của nồi hấp là vấn đề cần được quan tâm nghiêm túc.
Tiến hành thử nghiệm xác minh hiệu quả khử trùng của nồi hấp như thế nào?
1. Chuẩn bị vật liệu thí nghiệm
1. Đĩa giấy Bacillus stearothermophilus. Bacillus stearothermophilus là vi khuẩn chỉ thị sinh học thường được sử dụng trong phương pháp này, với hàm lượng bào tử là 5-105 CFU/miếng.
2. Thẻ chỉ thị hóa chất khử trùng bằng hơi nước áp suất 121℃.
3. Khử trùng môi trường nuôi cấy bromocresol purple peptone water ở nhiệt độ 116℃ trong 20 phút và để sang một bên.
Nhiệt kế giữ nhiệt độ 4.0-150℃.
2. Phương pháp thử nghiệm cụ thể
Sử dụng nhíp vô trùng để đặt đĩa giấy Bacillus stearothermophilus ưa nhiệt (đĩa vi khuẩn) vào ống nghiệm đã đậy kín. Thẻ chỉ thị hóa học và nhiệt kế điểm lưu được đặt trong ống nghiệm mở. Chuẩn bị 5-10 bản sao của mỗi ống nghiệm trên. Đặt chúng ở cổng hơi của nồi hấp, cổng xả dưới cùng, cổng thoát nước dưới cùng hoặc tại 5 vị trí ở giữa trên, dưới, trái và phải. Nếu máy tiệt trùng có hai lớp thì cần 10 chỗ.
Nhiệt kế điểm lưu chỉ có thể được sử dụng để kiểm tra xác minh sau khi đã đạt tiêu chuẩn. Trước khi thử nghiệm, cột thủy ngân của nhiệt kế cần được lắc xuống dưới 40°C. Sau mỗi lần theo dõi, chênh lệch nhiệt độ của nhiệt kế điểm lưu phải nằm trong phạm vi 1°C, nghĩa là sự phân bổ nhiệt độ trong máy tiệt trùng phải đồng đều.
Các lát vi khuẩn đã khử trùng phải được đặt trong môi trường nuôi cấy nước pepton tím bromocresol đã khử trùng ở nhiệt độ 56-60℃ trong 24-48 giờ trong điều kiện vận hành vô trùng nghiêm ngặt và phải quan sát sự thay đổi màu sắc. Nếu môi trường nuôi cấy chuyển sang màu vàng, điều đó có nghĩa là vi khuẩn Bacillus ưa nhiệt trong lát vi khuẩn chưa bị bất hoạt hoàn toàn và vi khuẩn vẫn có thể phát triển trong môi trường nuôi cấy, phân hủy glucose để tạo ra axit và chuyển sang màu vàng. Nếu môi trường nuôi cấy không đổi màu và vẫn có màu tím thì có nghĩa là bào tử đã bị bất hoạt. Đồng thời, nên đặt một đĩa giấy chưa khử trùng vào môi trường nuôi cấy làm đối chứng dương tính và sử dụng môi trường nuôi cấy trắng không có đĩa giấy làm đối chứng âm tính.
Khối màu chỉ thị trên thẻ chỉ thị hóa học sẽ chuyển từ vàng nhạt sang đen trong quá trình khử trùng bằng hơi nước áp suất cao. Bằng cách so sánh độ sâu màu với màu đối chứng, có thể đánh giá được hiệu quả khử trùng có đạt yêu cầu hay không. Thẻ chỉ thị hóa học phải được bảo quản ở nơi khô ráo. Nó sẽ đổi màu khi tiếp xúc với độ ẩm, ảnh hưởng đến việc quan sát hiệu quả khử trùng.
Tiệt trùng yến hũ bằng hơi nước áp suất cao đòi hỏi hơi nước phải đi vào máy tiệt trùng một cách trơn tru, tiếp xúc với vật dụng đã tiệt trùng và đẩy hết không khí lạnh ban đầu ra ngoài để đạt được hiệu quả tiệt trùng. Cần tiến hành kiểm tra phân phối nhiệt không tải và thẩm thấu nhiệt khi tải đầy (không vượt quá 2/3 tổng thể tích khi tải đầy). Hai lần xác minh này được lặp lại ba lần, tổng cộng là sáu lần.
Sáu lần thử nghiệm tại năm điểm cho thấy nhiệt độ đều là 121°C, thẻ chỉ thị hóa học chuyển sang màu đen, độ đồng nhất với màu đối chứng, môi trường nuôi cấy không đổi màu, cho thấy hiệu quả tiệt trùng bằng hơi nước áp suất cao đã đạt yêu cầu.
Xem thêm: Bạn có biết phương pháp hiệu chuẩn áp suất máy tiệt trùng không?
